Для определения тиамина, никотинамида и пиридоксина в лекарственном препарате можно использовать метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Шаги решения:
1. Подготовка пробы: Препарат мельчат до порошка и взвешивают необходимое количество. Затем проба адекватно растворяется в нужном объеме растворителя, например, мощеном метаноле.
2. Подготовка образца: Раствор пробы фильтруют через 0,45 мкм фильтр, чтобы удалить возможные частицы.
3. Колонка: Необходимо выбрать подходящую стационарную фазу. Одним из примеров может быть «C18», имеющая отличные разделительные свойства для витаминов группы В. Колонка должна быть достаточно эффективной и стабильной.
4. Условия анализа: В качестве мобильной фазы можно использовать смесь ацетонитрила и воды с добавлением 0,1% лимонной кислоты (или другой кислоты для поддержания кислой среды) для настройки pH. Необходимо провести оптимизацию условий разделения, изменяя состав мобильной фазы и параметры потока.
5. Тип детектора: Удобно использовать УФ-детектор с максимальной длиной волны, специфичной для каждого витамина. Для тиамина это может быть 365 нм, для никотинамида – 260 нм, а для пиридоксина – 290 нм.
6. Метод расчета: Возможно применение внешнего стандартного метода калибровки, где чистые соединения тиамина, никотинамида и пиридоксина используются для создания поверочных кривых удельной поглощающей способности. Расчет содержания вещества в препарате производится по формуле, основываясь на площади пика.
7. Хроматограмма: В результате анализа должна получиться хроматограмма, на которой различные витамины группы В будут представлены отдельными пиками с соответствующими временами удерживания.
Например, на хроматограмме будут видны три пика, соответствующие тиамину, никотинамиду и пиридоксину.
Обратите внимание, что точные условия анализа могут изменяться в зависимости от конкретных требований и возможностей лаборатории. Поэтому перед проведением анализа рекомендуется обратиться к литературным источникам или методическим руководствам для получения дополнительной информации.
